目標解析高脂血癥大鼠血小板性能的變動,探討復方丹參滴丸對高脂大鼠血小板性能的陰礙。
想法44只Wistar大鼠隨機分為正常比較組、高脂模子組、復方丹參滴丸組[160mgkg·d]、阿托伐他汀組[10mgkg·d],分組干預4周后檢測血脂程度總膽固醇CHO、甘油三酯TG、低密度脂蛋白膽固醇LDL-C、高密度脂蛋白膽固醇HDL-C的程度。利用酶聯免疫法測定血小板外表α-顆粒膜糖蛋白CD62P的濃度,流式細胞術FCM檢測血漿α顆粒膜蛋白-財神娛樂ptt140GMP140濃度。
結局高脂血癥組CHO、LDL-C明顯升高;CD62P及GMP140程度顯著升高;復方丹參滴丸組和阿托伐他汀組GMP140及CD62P程度明顯減低。
結論高脂血癥或許促使血小板活化,復方丹參滴丸具有與阿托伐他汀功效類似的壓制血小板活化的作用。
高脂血癥是心腦血管疾病的主要危險因素,血小板活化在血液黏度增高、血栓形成,以及動脈粥樣硬化的發作成長過程中起主要作用。血小板外表α-顆粒膜糖蛋白CD62P及血漿α顆粒膜蛋白-140GMP140程度反映血小板活化性能,是血小板活化的標志物,能特異地與活化血小板交融。我們通過對高脂血癥大鼠血小板性能的變動及復方丹參滴丸的干預研討,來評價復方丹參滴丸對于高脂血癥大鼠血小板性能的陰礙,以期對臨床財神娛樂出金有所協助。
A質料與想法
動物及分組
Wistar大鼠44只,體重269~298g,購自中國醫學科學院遺傳研討所試驗動物中央,及格證號SCXK京2005-0013。安適性餵養1周后隨機分組,正常比較組通例飼料喂養10只,高脂飼料組34只。高脂飼料配方2膽固醇、035膽酸鈉、03丙基硫氧嘧啶、5白糖、10豬油、8235根基飼料。4周后高脂模子制造勝利,隨機分成3組高脂比較組14只、復方丹參滴丸組10只、阿托伐他汀組10只,差別賜與高脂飼料、復方丹參滴丸天士立公司原料藥凈膏160mgkg·d、阿托伐他汀北京嘉林藥業股份有限公司生產10mgkg·d。除正常比較組外繼續高脂喂養,復方丹參滴丸、阿托伐他汀溶于2mL蒸餾水中每日罐胃1次,其余組每日賜與蒸餾水2mL罐胃,干預4周。高脂飼料組、阿托伐他汀組、復方丹參滴丸組各滅亡1只,辦妥實驗動物41只。
標本采集
在分組喂養前及高脂干預4周后,經內眥靜脈取血進行血脂解析。藥物干預4周后,各組經腹自動脈採用一次性采血針及負壓真空采血管進行標本采集。前2mL進行血脂解析,中間15mL用1多聚甲醛PFA15mL和38枸櫞酸鈉03mL的負壓抗凝管采血進行CD62P流式細胞儀FCM檢測,最后20mL用EDTA抗凝管采血,分解血漿測定GMP140程度。
血脂的丈量
血脂解析指標包含有膽固醇CHO、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白LDL-C4項指標。上述指標在我院檢修科生化室由技術檢修師檢測。全主動生化儀,型號RX-2000,美國TECHNICON公司生產。
CD62P的流式細胞術解析
熒光標誌抗體購自SANTACRUZBIOTECHNOLOGYINC公司,CD61PE批號sc-7311和CD62PFITC批號sc-8419。采血后全血靜置固定20min后,取5μL標本參加CD61PE、CD62PFITC熒光標誌單抗各5μL,室溫孵育20min后,加PBS至1mL重懸,利用COULTER公司的BECKMANCOULTERDU800型FCM進行解析。用SSC-FSC散點圖中找出血小板群R1、CD61PECD62PFITC散點圖中畫出血小板門及活化血小板。每份標本測定10000個血小板。比較管差別參加5μL羊抗兔IgGPE、羊抗兔IgGFITC作為比較。
GMP140測定
采血后分解血漿于-80℃冰箱凍存備用,利用太陽公司GMP140酶聯免疫試劑盒,嚴峻依照操作指南進行丈量。
B統計想法
所有數據以均數±尺度差±s表明,利用SPSS115軟件處置,兩組之間均數對照利用t檢修,多組間財神娛樂城 下載兩兩對照利用方財神娛樂城下載差解析。
結局
根基體重及血脂程度解析 財神娛樂下載
高脂干預之前,測定10只通例飼料組與隨機抽取10只高脂飼料組大鼠的體重、血脂解析各指標無顯著分別,即兩組之間的根基資料具有可比性(見表1)。
高脂喂養4周后血脂程度解析
高脂喂養4周后,通例飼料組大鼠10只和隨機抽取高脂飼料組大鼠16只進行血脂檢測,CHO、TG、LDL-C程度顯著升高、HDL-CCHO顯著減低,提示大鼠高脂模子制造勝利(見表2)。
復方丹參滴丸干預組血脂程度、血漿GMP140及血小板外表CD62P程度解析
繼續分組干預4周后檢測血脂程度、GMP140、CD62P等指標。正常比較組、高脂比較組、復方丹參滴丸組、阿托伐他汀組TG及HDL-C程度未見顯著分別P005。高脂比較組CHO、LDL-C最高,HDL-CCHO最低,GMP140、CD62P程度最高。說明高脂血癥組血小板活化水平最高。阿托伐他汀組血脂指標顯著改良的同時,GMP140、CD62P程度也顯著減低。復方丹參滴丸組CHO、LDL-C、HDL-CCHO與高脂血癥組比擬有改良的趨勢,但尚未到達統計學明顯性,不過GMP140、CD62P程度也顯著降落(見表3)。
由表3進一步解析可見,與高脂血癥組對照,復方丹參滴丸組與阿托伐他汀組GMP140、CD62P程度均顯著減低,且兩組之間無明顯分別,並且復方丹參滴丸及阿托伐他汀組,CD62P程度到達正常比較組程度,說明復方丹參滴丸與阿托伐他汀組干預功效類似GMP140P=0501,CD62PP=0705。
C商量
血脂反常、血小板活性提升和血管堵塞性并發癥的危險性深厚關連,在降脂的同時減低血小板活性在血栓性疾病的臨床調治和預防心臟活動的發作方面有著十分主要的意義。GMP140以血小板膜CD62P和血漿GMP140兩種格式存在,是反應血小板活化最具有特異性的標志物。在血栓形成過程中,GMP140起始動作用,使血小板與中性粒細胞黏附、聚集,形成血栓。FCM檢測CD62P表白是評價血小板活化性能較為正確的想法。本研討顯示,高脂血癥大鼠血漿GMP140程度和血小板CD62P表白顯著提升,也說明高脂血癥增進血小板的活化。
復方丹參滴丸固然沒有顯著的減低血脂程度的作用,但或許明顯減低高脂血癥大鼠CD62P及GMP140的程度,並且減低的水平與阿托伐他汀類似,說明復方丹參滴丸壓制血小板活化的作用與血脂程度無關。不不亂心絞痛UA患者存在血小板活化及纖溶活性反常,體現為GMP140含量升高、結構型纖維蛋白溶酶原活化劑t-PA活性降低和PAI-1活性增高。復方丹參滴丸能使UA患者血漿GMP140含量顯著減低,t-PA活性顯著升高,說明復方丹參滴丸能有效壓制血小板活化反映,改良纖溶活性。有研討表示復方丹參滴丸對血小板聚集率壓制作用根本上同等于、甚至優于阿司匹林,而臨床不佳反映較阿司匹林少。
本研討顯示阿托伐他汀在明顯減低CHO、LDL-C、提高HDL-CCHO比值的同時,顯著減低GMP140激CD62P程度,說明阿托伐他汀在有效調節脂代謝作用同時明顯壓制血小板活性,與Spencer研討結局雷同。